Priame metódy zisťovania počtov mikroorganizmov v prostredí (Úvod do mikrobiológie)

08.08.2011 16:18

 

Priame metódy:

 - sú rýchle, neodborné, finančne nenáročné, ale nedá sa robiť bližšia identifikácia, preto je vhodné metódy spájať.

1. Prepočítavanie MO v počítacích komôrkach Tomova a Birkerova:

  • Tomova komôrka sa skladá:

ü     Dve sklíčka, jedno je veľmi hrubé na počítanie menších organizmov (kvasinky, spóry húb) a druhé je hrubé krycie sklíčko. Výpočet sa vyjadruje podľa vzorca:

P = p . v . h . z

y

kde:

P = počet buniek kvasiniek v 1 mm3

p =  počet spočítaných buniek v 4 rôznych veľkých štvorcoch

v = prevrátená hodnota plochy jedného štvorca malého = 400

h = prevrátená hodnota hĺbky = 50

z = stupeň riedenia

y = počet štvorcov, v ktorých sme bunky počítali

2. Fixované farebné preparáty:

  • Farbia sa pomocou Bredovej a Chronovej metódy.

3. Fluorescenčná mikroskopia:

  • Je založená na svetielkovaní bunkových štruktúr (riboflavín – žltozelená, vitamín A1 – zelená, A2 – hnedožltá)
  • Používa sa akridínová oranž a živé bunky sú zelené a mŕtve sú červené